Usos de la levadura Pichia pastoris en la producción de proteínas recombinantes / Uses of Pichia pastoris yeast in the production of recombinant proteins

La levadura metilotrófica Pichia pastoris (clasificada actualmente como Komagataella phaffii) es una de las más importantes para la producción de proteínas heterólogas. En el trabajo se presenta un análisis de las principales características que se ponen de manifiesto en la expresión de proteínas recombinantes expresadas en este microorganismo. Se describen las cepas disponibles para la transformación y producción de proteínas recombinantes expresadas en Pichia pastoris, los principales vectores comerciales para la expresión, los promotores más eficientes, los marcadores seleccionables, la señal de secreción, los métodos usados en las transformaciones genéticas y los patrones de glicosilación que se presentan. Se brindan recomendaciones generales acerca de los parámetros de bioprocesos como la composición del medio, el pH, la temperatura, la velocidad de aireación, la inducción y las estrategias de alimentación para alcanzar altos valores de productividad. Se presentan los resultados de las aplicaciones de Pichia pastoris en la producción de dos vacunas en Cuba, la vacuna contra la hepatitis B y la vacuna para el control de la garrapata(AU)

Pichia pastoris metylotrofic yeast (currently classified as Komagataella phaffii) is one of the most important yeast for the production of heterologous proteins. The work presents an analysis of the main characteristics that are marked in the production of recombinant proteins expressed in Pichia pastoris. It describes the strains available for the transformation and production of recombinant proteins expressed in P. pastoris, the main commercial vectors for expression, the most efficient promoters, selectable markers, the secretion signal, the methods used in genetic transformations and glycosylation patterns that occur. General recommendations are provided on bioprocess parameters such as media composition, pH, temperature, aeration velocity, induction, and feeding strategies to achieve high productivity values. The results of Pichia pastoris applications for the production of two vaccines in Cuba, the hepatitis B vaccine and the tick control vaccine are shown(AU)

Assessment of weight gain and control of parasitism by Rhipicephalus microplus in dairy cattle in the field using organosynthetic parasiticide, phytotherapics and homeopathy / Avaliação do ganho de peso e controle do parasitismo por Rhipicephalus microplus em bovinos leiteiros a campo usando parasiticida organosintético, fitoterápicos e homeopatia

The goal of this research was to compare the effect of the following products on dairy cattle, parasitized by Rhipicephalus microplus: organosynthetics - Clorfenvinfós and Ivermectina (OG); phytotherapics - Eucalyptus oil (EG) and Neem cake (NG); Homeopathy (HG); The control group (CG) received no treatment. Infestation was by R. microplus (MIC) and weight gain (GP) were evaluated. The study included 60 animals (5 groups) from ­ Dutch / Zebu, aged between 25-44 months and initial weight between 211-477kg. EG and NG showed MIC 84.9% and 14.0% greater than CG, respectively (P <0.05; P = 0). HG and OG had MIC less than CG 24.4% and 16.9%, respectively (P<0.05; P <0.05). EG, NG and OG obtained GP lower than CG in 7.9%, 8.9% and 8.06% (P <0.05) respectively. The HG GP was 4.9% higher (P <0.05) than CG. This was the first research to prove parasitism control by R. microplus in a field test, using homeopathy. The methodology for choosing Homeopathy for the control of enzooties, developed and tested for the first time in this study, proved to be adequate and efficient, opening the possibility for establishing a new methodology for strategic control of parasitism by R. microplus.(AU)

O objetivo desta pesquisa foi comparar o efeito dos seguintes produtos sobre bovinos leiteiros, parasitados por Rhipicephalus microplus: organossintéticos - clorfenvinfós e ivermectina (OG); fitoterápicos - óleo de eucalipto (EG) e torta de Neem (NG) e homeopatia (HG). O grupo controle (CG) não recebeu tratamento. Foram avaliados infestação por R. microplus (MIC) e ganho de peso/grupo (GP) em 60 animais (5 grupos), a partir de ­ holandês/zebu, com idade entre 25 e 44 meses e peso inicial entre 211 e 477kg. EG e NG apresentaram MIC 84,9% e 14,0% maior que CG, respectivamente (P<0,05; P=0). HG e OG apresentaram MIC menor que CG 24,4% e 16,9%, respectivamente (P<0,05; P<0,05). EG, NG e OG obtiveram GP menor que CG em 7,9%, 8,9% e 8,06% (P<0,05), respectivamente. O GP do HG foi 4,9% maior (P<0,05) que o CG. Esta foi a primeira pesquisa a comprovar controle do parasitismo por R. microplus em teste a campo, usando homeopatia. A metodologia para escolha de medicamentos homeopáticos para controle de enzootias, desenvolvida e testada pela primeira vez neste estudo, mostrou-se adequada e eficiente, abrindo a possibilidade para estabelecimento de nova metodologia para controle estratégico do parasitismo por R. microplus.(AU)

In vitro efficacy of two commercial products of Metarhizium anisopliae s.l. for controlling the cattle tick Rhipicephalus microplus / Eficácia in vitro de dois produtos comerciais de Metarhizium anisopliae s.l. no controle do carrapato bovino Rhipicephalus microplus

Abstract The effects of two different products - Metarril® SP Organic (dry conidia) and Metarril® SC Organic (emulsifiable concentrated conidia in vegetable oil) - on eggs, larvae and Rhipicephalus microplus engorged females were here explored. Three concentrations (108, 107, and 106 conidia mL-1) for both products were prepared in water + 0.1% Tween® 80 (v/v); afterward, bioassays were carried out for all R. microplus stages by immersion in suspensions (Metarril® SP) or formulations (Metarril® SC). Metarril® SP suspensions showed low efficacy and did not affect biological parameters of treated engorged females; for eggs and larvae, only slight decreases in hatchability and larvae population were observed. Despite a delay in germination, Metarril® SC presented better results; for females, reductions in Egg Mass Weight (EMW) and Egg Production Index (EPI) were reported. On eggs, 108 conidia mL-1 increased Incubation Period (IP), shortened Hatching Period (HP) and decreased hatchability by up to 61%; for larvae, 107 and 108 conidia mL-1 reached 99.6 and 100% larval mortality respectively, 10 days after fungal exposure. Thus, further studies involving the use of oil-based formulations for ticks such as Metarril® SC need to be performed, especially to control the most susceptible stages (eggs and larvae).

Resumo No presente trabalho, os efeitos de dois diferentes produtos foram avaliados - Metarril® SP Organic (conídios secos) e Metarril® SC Organic (conídios concentrados em óleo vegetal) - para ovos, larvas e fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus microplus. Três concentrações (108, 107 e 106 conídios mL-1) para cada produto foram preparadas em água + Tween® 80 0,1% (v/v); os bioensaios foram realizados para todos os estágios de R. microplus por imersão nas suspensões (Metarril® SP) ou formulações (Metarril® SC). Metarril® SP não afetou os parâmetros biológicos das fêmeas, demonstrando assim baixa eficácia; para ovos e larvas, foram observadas discretas diminuições na eclodibilidade e na população de larvas. Apesar de um atraso na germinação, Metarril® SC apresentou melhores resultados; para as fêmeas, foram detectadas reduções no Peso da Massa de Ovos (PMO) e no Índice de Produção de Ovos (IPO). Para os ovos, a concentração de 108 conídios mL-1 aumentou o Período de Incubação (PI), reduziu o Período de Eclosão (PE) e também o da eclodibilidade em até 61%; para larvas, 107 e 108 conídios mL-1 atingiram 99,6 e 100% de mortalidade larval, respectivamente, 10 dias após a exposição fúngica. Com isso, estudos adicionais que envolvem o uso de formulações à base de óleo para carrapatos, como Metarril® SC, precisam ser realizados, especialmente para controlar os estágios mais suscetíveis (ovos e larvas).

Integrated tick control on a farm with the presence of capybaras in a Brazilian spotted fever endemic region / Controle integrado do carrapato em uma fazenda com presença de capivaras em região endêmica para febre maculosa brasileira

Abstract Ticks of the Amblyomma cajennense complex present high infestation rates. These ticks transmit the bacterium Rickettsia rickettsii, which causes Brazilian Spotted Fever. For this reason, an integrated tick control system was adopted on a farm in the municipality of Itu, state of São Paulo. On this farm, which borders the Tietê river, domestic animals are in contact with populations of capybaras. Six locations were monitored and evaluated between the years of 2015 and 2017. During this work 1271 nymphs and adult ticks were caught, all of them from the Amblyomma sculptum species, except for a single individual from the Amblyomma dubitatum species. The integrated tick management reduced the overall infestation levels to zero. Adult tick population dropped in the first year of the study, while larvae population dropped in the second year. Nymph population dropped in both years, decreasing in higher numbers in the first year. The estimated mean infestation levels for all of the tick's life cycle forms in the six monitored spots did not reach one individual in the end of the study. Estimated mean infestation levels for nymphs in these places equaled zero.

Resumo Em virtude de alta infestação por carrapatos do complexo Amblyomma cajennense, parasitos que transmitem a bactéria Rickettsia rickettsii, causadora da Febre Maculosa Brasileira, adotou-se um sistema de controle integrado dos carrapatos numa propriedade rural localizada no munícipio de Itu - SP. Na propriedade, que margeia o rio Tietê, os animais domésticos mantinham contato com populações de capivaras. Seis locais foram avaliados e monitorados nos anos de 2015 a 2017. Dentre os 1271 espécimes capturados (adultos e ninfas) um foi identificado como Amblyomma dubitatum e os demais com Amblyomma sculptum. De um modo geral, houve controle da infestação de carrapatos visto que todos os estágios ao final de 2017 apresentaram níveis próximos ou igual a zero. A população de adultos teve queda no primeiro ano e a de larvas no segundo. As ninfas apresentaram queda nos dois anos, sendo mais acentuada no primeiro ano. A média da estimativa do nível de infestação para cada estágio do carrapato nos seis locais monitorados não chegou a 1 indivíduo ao final do experimento, sendo que a média da estimativa para as ninfas foi de zero em todos esses locais.

Chemical composition and acaricidal activity of Ocotea notata (Lauraceae), an endemic species from Brazil, against the cattle tick Rhipicephalus microplus / Composición química y actividad acaricida de Ocotea notata (Lauraceae), una especie endémica de Brasil, contra la garrapata del ganado Rhipicephalus microplus

Rhipicephalus microplus, is one parasites that cause severe productivity losses in the cattle industry of Brazil and shows increasing resistance to conventional pesticides. This research aims to study the chemical composition, and acaricidal activity of the essential oil from Ocotea notata leaves, a brazilian endemic species, against R. microplus. The effect on R. microplus engorged adult females was evaluated using the immersion test. The oil reduced the survival by 90% after incubation for 15 days and there was 100% reduction for posture inhibition and reproductive capacity. These results suggest that the O. notata essential oil has activity on the R. microplus.

Rhipicephalus microplus, es un parásito que causa graves pérdidas de productividad en la industria ganadera de Brasil y muestra una creciente resistencia a los pesticidas convencionales. Esta investigación tiene como objetivo estudiar la composición química y la actividad acaricida del aceite esencial de las hojas de Ocotea notata, una especie endémica brasileña, contra R. microplus. El efecto sobre las hembras adultas engordadas de R. microplus se evaluó mediante la prueba de inmersión. El aceite redujo la supervivencia en 90% después de la incubación durante 15 días y hubo una reducción del 100% para la inhibición de la postura y la capacidad reproductiva. Estos resultados sugieren que el aceite esencial de O. notata tiene actividad contra R. microplus.

Perfil do produtor de leite da região de Joanópolis/SP: como ele lida com o controle do carrapato Rhipicephalus microplus e de outras doenças de importância veterinária / Profile of dairy farmers of the Joanópolis/SP region, Brazil: how they deal with Rhipicephalus microplus control and other diseases of veterinary interest

Este estudo verificou o perfil do produtor de leite do município de Joanópolis, SP, situado a 115 km de São Paulo, e como esse produtor lida com o controle do carrapato e outras doenças importantes na pecuária leiteira. Quarenta produtores de leite foram entrevistados. Verificou-se que grande parte deles se enquadra em agricultura familiar: pequenas propriedades com mão-de-obra familiar. Verificou-se que 72,5% possuem outra fonte de renda além do leite; 75% produzem menos que 100 litros de leite por dia, e a maioria não é tecnificada (ordenha manual: 72,5 %; não faz escrituração zootécnica: 55%; não aduba pastos: 80%; não utiliza inseminação artificial: 87,5%). O controle do carrapato é feito sem critérios técnicos; a aplicação do carrapaticida é feita no mesmo local da ordenha; 90% não usam equipamentos de proteção individual para aplicar o carrapaticida. O gado prevalente é o mestiço Girolando (87,5%), que, por ser mais resistente ao carrapato, deve contribuir para que 57,5% dos entrevistados estejam satisfeitos com o controle do carrapato. Verificou-se que poucos produtores (apenas 12,5%) possuem assistência técnica constante. Isso pode ser a explicação para o baixo uso de tecnologias e nas falhas observadas no diagnóstico das doenças e no controle do carrapato.(AU)

This study made a detailed description of the milk producer of the municipality of Joanópolis/SP, situated 115 km from the largest city of Brazil, São Paulo, and how they deal with tick control and other important diseases for dairy farming. Forty milk producers were interviewed. It was found that most of them fit into family farms: small farms with family labor; 72.5% have another source of income in addition to the milk; 75% produce less than 100 liters of milk per day; and most of them are not technified (72.5% do manual milking; 55% do not keep zootechnical records; 80% do not fertilize the pastures; 87.5 % do not use artificial insemination). Tick control is made without technical criteria. A hundred percent of the interviewed applied the acaricide in the same place of milking; 90% do not use protective equipment to apply the acaricide. The prevalent cattle breed is the crossbred Girolando (87.5%), a more tick resistant breed. This may contribute to 57.5% that are satisfied with tick control. It was found that few producers (only 12.5%) have constant technical assistance. This may be the explanation for the low use of technologies and the failures observed in the diagnosis of diseases and the use of tick control.(AU)

Acaricidal activity of leaves of Morus nigra against the cattle tick Rhipicephalus microplus / Atividade acaricida das folhas de Morus nigra em carrapato Rhipicephalus microplus

The acaricidal activity of crude ethanolic extract and fractions from the leaves of Morus nigra (Moraceae) was carried out on female cattle ticks Rhipicephalus microplus, using the adult immersion test. The mortality and fertility of females exposed to different concentrations of hexane, chloroform and ethyl acetate fractions, as well as ethanolic extract of M. nigra with concentrations of 5, 10 and 25mg/ml were evaluated using three treatment groups, two control groups and triplicate tests. The study also identified the main phenolic compounds of the extract and fractions of this species by HPLC. The chloroform fraction of leaves of M. nigra (25mg/mL) showed the best results for this species, obtaining 62.6% of inhibition of oviposition, 39.3% of eggs eclosion average and 65.4% of effectiveness. HPLC analysis revealed the presence of phenolic compounds, which may be related to biological activity shown by the extracts, which can be used as an alternative control against R. microplus adult tick.(AU)

A atividade acaricida do extrato etanólico bruto e das frações das folhas de Morus nigra (Moraceae) foi avaliada no carrapato Rhipicephalus microplus, utilizando-se o teste de imersão de fêmeas ingurgitadas. Foram avaliadas a mortalidade e a fertilidade das fêmeas ingurgitadas, expostas a diferentes concentrações (5, 10 e 25 mg/mL) das frações hexânica, clorofórmica e acetato de etila, bem como do extrato etanólico. Os testes foram realizados em triplicata. O estudo também identificou os principais compostos fenólicos do extrato e das frações dessa espécie por HPLC. A fração clorofórmica das folhas de M. nigra (25mg/mL) apresentou o melhor resultado para essa espécie, obtendo-se 62,6% de inibição da oviposição, 39,3% da eclosão dos ovos e 65,4% de eficácia. A análise por HPLC revelou a presença de compostos fenólicos, os quais podem estar relacionados com a atividade biológica demonstrada pelos extratos, que podem ser utilizados como auxiliar no controle contra carrapato adulto de R. microplus.(AU)

Efficacy of oral doramectin as treatment for Psoroptes ovis and Leporacarus gibbus in naturally infested rabbits / Eficácia de doramectin no tratamento oral para Psoroptes ovis e Leporacarus gibbus em coelhos naturalmente infestados

The present study evaluated the efficacy of a single oral dose of doramectin in the control of Psoroptes ovis and Leporacarus gibbus in naturally infested rabbits. Sixteen adult rabbits were selected and distributed in two experimental groups. The treated group received 200 µg/Kg of oral doramectin and the control group received the same volume of saline solution. The diagnosis of the mites was made with a stereoscopic microscope. Hairs from the dorsal part of the neck, lumbar right, lumbar left, ventral side of the tail and ventral abdomen were evaluated for L. gibbus, and ear wax evaluated for P. ovis. The evaluation of the efficiency and the clinical assessment of the lesions was made in days 0, +3, +7, +14, +21, +28, and +35 after treatment. An efficacy of 75% and 87,5% was observed for L. gibbus in days +3 and +7 after treatment, an efficacy of 100% was observed in days +14, + 21, +28 e +35. An efficacy of 100% for the control of P. ovis was observed following day +7. The clinical lesion score of the control group remained unaltered, except for one animal which conditions worsened during experimentation. In the treated group animals, regression of the lesions was observed following day +3, and on day +21 no signal of infestation by P. ovis was present. None of the animals from the treated group presented secondary collateral effects caused by the doramectin, which proved itself as an optimal alternative for mite control in naturally infested rabbits.(AU)

O objetivo do trabalho foi avaliar a eficácia da doramectina administrada por via oral no controle de Psoroptes ovis e Leporacarus gibbus em coelhos naturalmente infestados. Foram selecionados 16 coelhos adultos, distribuídos em dois grupos experimentais, compondo oito animais por grupo. O grupo tratado foi medicado com 200µg/kg de doramectina por via oral, enquanto que no grupo controle foi administrado o mesmo volume de solução salina. O diagnóstico dos ácaros foi realizado com auxílio de microscópio estereoscópico. Foram coletados pelos das regiões do pescoço dorsal, lombar direita, lombar esquerda, cauda ventral e abdômen ventral para avaliação de L. gibbus e para P. ovis foi coletado cerúmen das orelhas com auxílio de zaragatoas. A avaliação da eficácia e a avaliação clínica das lesões, mensuradas em escores (grau 0 a 4), foi realizada nos dias 0, +3, +7, +14, +21, +28 e +35, após o tratamento. Foi observada eficácia de 75% e 87,5% no controle de L. gibbus nos dias +3 e +7 após o tratamento, sendo observada eficácia de 100% nos dias +14, + 21, +28 e +35. Foi observada eficácia de 100% no controle de P. ovis a partir do dia +7, permanecendo até o final do período observacional. O escore das lesões clínicas no grupo controle permaneceu de forma inalterada, exceto em um animal que piorou ao longo dos dias experimentais, enquanto nos animais do grupo tratado regrediu a partir do dia +3 e já no dia +21 após o tratamento, os animais apresentavam-se sem sinais da infestação por P. ovis. Nenhum animal do grupo tratado apresentou quaisquer efeitos colaterais secundários causados pela doramectina, que se mostrou uma ótima alternativa para o controle dos ácaros em coelhos naturalmente parasitados.(AU)

Management and control of parasites on dairy farms in northwestern region of São Paulo state / Manejo e controle de parasitas em fazendas leiteiras da região noroeste paulista

Abstract Dairy cattle farming is of great economic and social importance in all Brazilian’s regions. Parasites can reduce milk productivity, especially the tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus. This study consisted of a questionnaire answered by 40 milk producers in the northwestern region of the State of São Paulo. The aim was to ascertain how these producers controlled ticks and other parasites. Very many of them knew nothing about the biological cycle of the cattle tick or about strategic control or acaricide efficacy tests. The majority (87.5%) controlled ticks at a high frequency, without technical criteria and care to apply the acaricide. Spraying was the most used mode of acaricide application (95%) and endectocides were used by 45%. Cattle tick fever was the harm most associated with ticks (87.5%) followed closely by screwworm (77.5%). However, 65% were satisfied with their tick control. About the control of others parasites, all dewormed at least twice a year their animals; 65% were controlling horn fly; 40% had problems with screwworm. The interviewers had in general good level of education and the farms generally exhibited a high degree of technology for milk production on pasture because half of them received technical assistance frequently.

Resumo A bovinocultura leiteira é de extrema importância econômica e social em todas as regiões brasileiras. Os parasitas podem reduzir a produção leiteira, especialmente o carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Este trabalho consistiu em um questionário respondido por 40 produtores de leite da região noroeste do Estado de São Paulo, com o objetivo de saber como os produtores controlam carrapatos e outros parasitas. Grande parte deles não conhecia o ciclo biológico do carrapato do boi nem o controle estragégico e o teste de eficácia de carrapaticidas. A maioria (87,5%) controlava o carrapato com alta frequência, sem critérios técnicos e cuidados na aplicação do carrapaticida. A aspersão foi o modo de aplicação mais usado (95%) e endectocidas eram utilizados por 45%. Tristeza parasitária bovina foi o prejuízo mais associado ao carrapato (87,5%), seguido de perto pela bicheira (77,5%). No entanto, 65% estavam satisfeitos com o controle do carrapato. A maioria (82,5%) criava gado mestiço. Em relação ao controle de outros parasitas, todos vermifugavam seus animais pelo menos duas vezes por ano; 65% deles controlava a mosca-do-chifre; 40% têm problemas com bicheira. Os entrevistados, de forma geral, tinham bom nível educacional, e as fazendas geralmente exibiam alto grau de tecnologia em produção de leite a pasto, porque metade delas recebia assistência técnica constante de um programa estatal que incentiva a produção leiteira sustentável.

Avaliação da eficácia de produtos isoterápicos no controle de Rhipicephalus (Boophilus) microplus / Evaluation of the efficacy of products isoterapicos in control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus

O Rhipicephalus (Boophilus) microplus é responsável por consideráveis perdas na pecuária brasileira. O controle desse parasita tem sido feito, principalmente, com o uso de carrapaticidas, sendo os isoterápicos uma alternativa para seu combate. Objetivou-se neste trabalho analisar a eficiência da utilização da isopatia como ferramenta de controle alternativo do carrapato-do-boi. Foram utilizadas 18 fêmeas bovinas de raça europeia, mantidas em sistema de pecuária extensiva, no município de Canguçu, Rio Grande do Sul. Os animais foram divididos em grupo controle (Lote A) e grupo tratado com isoterápico (Lote B). O sal mineral foi utilizado como veículo para a administração da isopatia, sendo que o Lote A recebeu sal mineral com placebo (açúcar) e o Lote B sal mineral com isopatia. Os animais foram infestados artificialmente com 10 mil larvas deR. (B.) microplus , e no 20º, 21º e 22º dias pós-infestação, foram realizadas contagem e coleta de fêmeas ingurgitadas. As teleóginas de cada lote foram divididas ao acaso em nove grupos de dez indivíduos para análise dos parâmetros biológicos e posterior cálculo do Índice Nutricional e Índice de Eficácia Reprodutiva. Para comparação da média de teleóginas de cada grupo, foi empregada análise de variância e Teste LSD. Os bovinos tratados com isopatia apresentaram uma redução de 53,4% do número médio de teleóginas, quando comparados com o grupo não tratado (p = 0,001). Quanto aos padrões biológicos, não houve diferença estatística. Conclui-se que o uso de isopatia foi capaz de reduzir a infestação de R.(B.) microplus , mostrando-se uma alternativa promissora para o controle deste ixodídeo.(AU)

The Rhipicephalus (Boophilus)microplus is responsible for considerable losses in Brazilian cattle. The control of such parasites has been done mainly with the use of acaricides, and the isopathy is an alternative. The objective of this work is to analyze the efficiency of the use of isopathy as an alternative tool to control the cattle tick. We used 18 cows of the European race, kept in extensive livestock system in the municipality of Canguçu, Rio Grande do Sul, Brazil. The animals were divided into control group (Lot A) and group treated with isopathy (Lot B). Mineral salt was used as a vehicle for the administration of isopathy, Lot A received mineral salt with placebo (sugar) and Lot B received mineral salt with isopathy. The animals were artificially infested with 10 thousand larvae of R. (B.) microplus , and in the days 20, 21 and 22 post-infestation engorged females were counted and collected. The ticks from each batch were randomly divided into nine groups of ten subjects each for analysis of biological parameters and subsequent calculation of the Nutritional Index and the Effectiveness Reproductive Index. For comparison of average engorged females from each group were employed ANOVA and LSD Test. The animals treated with isopathy showed a 53.4% reduction in the average number of ticks when compared with the untreated group (p = 0.001). As for biological standards, there was no statistical difference. It is concluded that the use of isopathy was able to reduce infestation of R. (B.) microplus , showing up as a promising alternative to control this ticks.(AU)

Approaches towards tick and tick-borne diseases control

Ticks are obligate haematophagous ectoparasites of wild and domestic animals as well as humans, considered to be second worldwide to mosquitoes as vectors of human diseases. Tick-borne diseases are responsible worldwide for great economic losses in terms of mortality and morbidity of livestock animals. This review concerns to the different tick and tick-parasites control methods having a major focus on vaccines. Control of tick infestations has been mainly based on the use of acaricides, a control measure with serious drawbacks, as responsible for the contamination of milk and meat products, as a selective factor for acaricide-resistant ticks and as an environmental contaminant. Research on alternatives to the use of acaricides is strongly represented by tick vaccines considered a more cost-effective and environmentally safe strategy. Vaccines based on the Bm86 tick antigen were used in the first commercially available cattle tick vaccines and showed good results in reducing tick numbers, affecting weight and reproductive performance of female ticks which resulted in reduction of cattle tick populations over time and consequently lower reduction of the pathogen agents they carry.

Caracterização do controle de Haematobia irritans e Rhipicephalus (Boophilus) microplus no Triângulo Mineiro e Alto Paranaíba, Minas Gerais / Characterization of Haematobia irritans and Rhipicephalus (Boophilus) microplus control in Triângulo Mineiro and Alto Paranaíba, Minas Gerais

O controle eficaz de Haematobia irritans (mosca-dos-chifres) e Rhipicephalus (Boophilus) microplus (carrapato-do-boi) é um fator crucial à maior rentabilidade da pecuária brasileira, porém ainda constitui-se um desafio. Um maior conhecimento das práticas adotadas no combate destes parasitos faz-se necessário para que se possam estruturar estratégias de controle mais próximas da realidade do produtor rural e mais fáceis de serem executadas. Este estudo caracterizou, através de entrevistas, as práticas adotadas no controle desses ectoparasitos em 23 propriedades da mesorregião do Triângulo Mineiro e Alto Paranaíba, Minas Gerais. A maioria dos entrevistados reconheceu a importância desses parasitos para a atividade pecuária, entretanto, diversos problemas relativos ao controle parasitário foram observados. O controle da mosca-dos-chifres e do carrapato-do-boi era uma prática rotineira em, respectivamente, 17,4% e 95,7% das propriedades, geralmente realizado em função de elevado grau de infestação dos animais. Mais de seis aplicações de ectoparasiticidas eram realizadas por ano em todas as propriedades que empregavam tratamentos para o controle da mosca e em 76,5% daquelas que combatiam o carrapato. Os produtos eram aplicados principalmente com bombas costais manuais (63,6%) e sem a contenção dos animais em 45,5% das propriedades. A diluição dos produtos segundo recomendações dos fabricantes era realizada por 45,4% dos entrevistados, porém, 63,6% aplicavam um volume de solução por animal menor do que o tecnicamente recomendado. Utilizava-se principalmente a associação de piretróides e organofosforados para o controle de ambos os parasitos. Apesar de utilizar rotineiramente ectoparasiticidas, o uso de equipamento de proteção individual (EPI) não era comum entre os entrevistados. A maioria dos entrevistados conhecia algumas características epidemiológicas dos parasitos, entretanto, o controle parasitário adotado na maior parte das propriedades tende a comprometer não apenas a eficácia dos tratamentos, mas a suscetibilidade dos parasitos e a sustentabilidade do controle.

The effective control of Haematobia irritans (horn fly) and Rhipicephalus (Boophilus) microplus (cattle tick) is crucial for increasing the productivity of livestock industry in Brazil, but still remains a challenge. A greater knowledge about parasite control in the field is necessary to establish control strategies closer to farmer's reality and easier to be performed. This study characterized the practices adopted for controlling such ectoparasites on 23 cattle ranches from the Triângulo Mineiro and Alto Paranaíba region in the state of Minas Gerais, through interviews. Most interviewees recognized the importance of these parasites to livestock, however, many problems related to parasite control were observed. Control of horn flies and cattle tick was a routine in 17.4% and 95.7% of the ranches, respectively, triggered by high infestations on animals. More than six insecticide/acaricide treatments were applied yearly in all cattle ranches controlling horn flies and in 76.5% of the ranches controlling the cattle tick. Pesticide products were applied mostly by manual backpack sprayers (63.6%) without restraining the animals in 45.5% of ranches. Product dilution following manufacturer's recommendations was performed by 45.5% of interviewees, but 63.6% of them used lower doses per animal than technically recommended. Associations of organophosphates and pyrethroids were the main products used to control both parasites. Although pesticide use was a routine practice, the use of personal protective equipment (PPE) was not common among surveyed people. Most interviewees were able to recognize epidemiological characteristics of the parasites; however, parasite control measures adopted at most cattle ranches tend to jeopardize the efficacy of products, susceptibility of parasites and sustainability of control programs.

Perspectives for the use of plant extracts to control the cattle tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus / Perspectivas para o uso de extratos de plantas para o controle do carrapato de bovinos Rhipicephalus (Boophilus) microplus

The evolution of resistance of Rhipicephalus (Boophilus) microplus to synthetic acaricides has given rise to the need for new scientific investigations on alternative ways to control this tick. In this regard, various studies on plants have been developed in an attempt to find extracts with acaricidal properties. Evaluations on plant extracts for controlling R. (B.) microplus have grown intensely over the last decade. There are many advantages from using plant extracts: for example, they can be used in organic cattle farming or even replace synthetic acaricides and they are associated with lower environmental and food contamination, slower development of resistance and lower toxicity to animals and humans. In vitro studies on plant extracts have shown promising results, but most of these extracts have not been tested on animals to validate their use. Difficulties in preparing proper formulations, differences in the chemical composition of plants of the same species due to extrinsic and intrinsic factors and sparse information on active acaricide compounds are hindrances that need to be addressed in order to enable progress within this scientific field.

A evolução da resistência do Rhipicephalus (Boophilus) microplus aos acaricidas sintéticos tem impulsionado novas investigações científicas sobre métodos alternativos para controlar este carrapato. Considerando isso, vários estudos com plantas têm sido desenvolvidos numa tentativa de encontrar extratos com propriedades acaricidas. Avalições de extratos de plantas para o controle de R. (B.) microplus tem sido intensificadas nesta última década. Existem muitas vantagens com o uso de extratos de plantas no controle deste carrapato, como: eles podem ser utilizados na produção orgânica de bovinos, ou mesmo substituir os acaricidas sintéticos, além do mais, estão associados com baixa contaminação ambiental e dos alimentos, desenvolvimento mais lento de resistência e baixa toxicidade para animais e seres humanos. Estudos in vitro de extratos de plantas têm apresentado resultados promissores, mas a maioria destes extratos não têm sido testada em animais para validar estes resultados. Dificuldades para preparar formulações apropriadas, diferenças na composição química de plantas de uma mesma espécie devido a fatores intrínsecos e extrínsecos e informações esparsas.sobre os princípios ativos são entraves que precisam ser solucionados visando o desenvolvimento deste campo de pesquisa.

Selective control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus in fipronil-treated cattle raised on natural pastures in Lages, State of Santa Catarina, Brazil / Controle seletivo do Rhipicephalus (Boophilus) microplus em bovinos criados em campo nativo, no município de Lages, Santa Catarina, Brasil

An examination of a selective control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus and consequent cost reduction was carried out in two areas of native pasture in the municipality of Lages, State of Santa Catarina, Southern Brazil, from May 2007 to April 2009. Forty cattle were divided into two groups of 20 animals each (conventional and selective control groups). At 14-day intervals female ticks larger than 4.5 mm found on the right flank of cattle bodies were counted, and these results multiplied by two. Fipronil 1 mg.kg-1 pour on was then administered for tick control. In the conventional group all the cattle were treated when tick count averaged more than 40 female ticks per animal while in the selective group only animals parasitized by more than 40 ticks were treated with acaricide. Every 28 days the cattle's weight was checked for cost-effective analysis. The conventional group required an additional 20 doses of fipronil compared with the selective one. There was no statistically significant differences regarding weight gain in both groups.

Com o objetivo de avaliar o método de controle seletivo do Rhipicephalus (Boophilus) microplus e reduzir os custos para o controle, de maio de 2007 a abril de 2009, em duas invernadas de campo nativo no município de Lages, SC, utilizaram-se 40 bovinos que foram divididos em dois grupos (convencional e seletivo), de 20 animais cada. A cada 14 dias foi realizada a contagem das fêmeas maiores ou igual a 4,5 mm, no lado direito do corpo dos animais, e o valor obtido, multiplicado por dois. Foi utilizado fipronil 1 mg.kg-1 pour on para o controle de carrapatos. No grupo convencional, foram tratados todos os bovinos quando a média do grupo foi igual ou superior a 40 fêmeas e no grupo seletivo, foram tratados apenas os animais que apresentaram uma infestação igual ou superior a 40. A cada 28 dias foi realizada a pesagem dos animais para análise da relação custo/benefício. Foram realizadas 20 aplicações a mais do carrapaticida no grupo convencional em relação ao seletivo. Não houve diferença estatística entre o ganho de peso do grupo convencional em relação ao grupo seletivo.

Ação de extrato e óleo de nim no controle de Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) (Acari: Ixodidae) em laboratório / Action of extract and oil neem in the control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) (Acari: Ixodidae) in laboratory

Extratos vegetais orgânicos e óleos emulsionáveis de Azadirachta indica A. Juss (Meliaceae) (nim) foram estudados com o objetivo de avaliar seus efeitos no controle de fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) em laboratório. Foram utilizados extratos orgânicos hexânicos e alcoólicos a 2 por cento (peso/volume), em testes de imersão, durante 5 minutos, preparados com sementes, solubilizados em dimetilsulfóxido (DMSO) a 1 por cento. O experimento foi inteiramente casualizado, sendo constituído por 6 tratamentos e 5 repetições, cada uma delas representada por 5 carrapatos. O grupo controle consistiu de fêmeas sem tratamento. Com base nos resultados deste trabalho, pode-se indicar que os tratamentos extrato de semente (hexano) e óleo emulsionável I¹, em concentração a 2 por cento, possuem significativo potencial adjuvante de controle do carrapato bovino, pois ocasionam a mortalidade nos primeiros dias após o tratamento e interferem na reprodução, mostrando ser uma alternativa aos carrapaticidas normalmente utilizados.

Organic plant extracts and emulsified oil of Azadirachta indica A. Juss (Meliaceae) (neem) were studied to evaluate its effects in control of engorged females of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) in the laboratory. Hexane and alcoholic organic extracts, 2 percent (weight/volume) were used in tests of immersion for 5 minutes, prepared with seeds, solubilized in dimethylsulfoxide (DMSO) to 1 percent. The experiment was entirely randomized, consisting of 6 treatments and 5 replicates, each represented by 5 ticks. Control groups consisted of untreated females. Based on the results of this work, we can indicate that the seed extract (hexanic fraction) and óleo emulsionável I1 concentration to 2 percent have significant adjuvant potential to control the cattle tick, because, cause the mortality in the first days after the treatment and interfere in the reproduction, showing to be an alternative to acaricides normally used.

Ação de extrato e óleo de nim no controle deRhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) (Acari: Ixodidae) em laboratório / Action of extract and oil neem in the control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus

Extratos vegetais orgânicos e óleos emulsionáveis de Azadirachta indica A. Juss (Meliaceae) (nim) foram estudados com o objetivo de avaliar seus efeitos no controle de fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) em laboratório. Foram utilizados extratos orgânicos hexânicos e alcoólicos a 2% (peso/volume), em testes de imersão, durante 5 minutos, preparados com sementes, solubilizados em dimetilsulfóxido (DMSO) a 1%. O experimento foi inteiramente casualizado, sendo constituído por 6 tratamentos e 5 repetições, cada uma delas representada por 5 carrapatos. O grupo controle consistiu de fêmeas sem tratamento. Com base nos resultados deste trabalho, pode‑se indicar que os tratamentos extrato de semente (hexano) e óleo emulsionável I1, em concentração a 2%, possuemsignificativo potencial adjuvante de controle do carrapato bovino, pois ocasionam a mortalidade nos primeiros dias após o tratamento e interferem na reprodução, mostrando ser uma alternativa aos carrapaticidas normalmente utilizados.

Organic plant extracts and emulsified oil of Azadirachta indica A. Juss (Meliaceae) (neem) were studied to evaluate its effects in control of engorged females of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) in the laboratory. Hexane and alcoholic organic extracts, 2% (weight/volume) were used in tests of immersion for 5 minutes, prepared with seeds, solubilized in dimethylsulfoxide (DMSO) to 1%. The experiment was entirely randomized, consisting of 6 treatments and 5 replicates, each represented by 5 ticks. Control groups consisted of untreated females. Based on the results of this work, we can indicate that the seed extract (hexanic fraction) and óleo emulsionável I1 concentration to 2% have significant adjuvant potential to control the cattle tick, because, cause the mortality in the first days after thetreatment and interfere in the reproduction, showing to be an alternative to acaricides normally used.

Efeito do controle estratégico de Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (acari: ixodidae) sobre a população de Anocentor nitens (Neumann, 1897) (acari: ixodidae) em eqüinos / Effect of the strategic control of Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (acari: ixodidae) on the population of Anocentor nitens (Neumann, 1897) (acari: ixodidae) in equines

Objetivou-se avaliar o efeito de um programa de controle estratégico de Amblyomma cajennense sobre a população de Anocentor nitens em eqüinos. Os tratamentos carrapaticidas foram realizados a cada sete dias e divididos em dois módulos, o primeiro com início em abril de 2004 (oito tratamentos) e o segundo com início em julho do mesmo ano (cinco tratamentos), utilizando-se a base química piretróide - cipermetrina na concentração de 0,015 por cento. Avaliou-se mensalmente a carga parasitária de A. nitens no pavilhão auricular e divertículo nasal dos eqüinos antes (outubro de 2003 a março de 2004) e depois (outubro de 2004 a março de 2005) do controle estratégico com banhos carrapaticidas. Utilizaram-se escores de 0 a 3 para classificar os níveis de infestação. Entretanto, não houve redução significativa da carga parasitária de A. nitens no pavilhão auricular e no divertículo nasal dos eqüinos, possivelmente, devido a não aplicação sistemática de carrapaticida no divertículo nasal, pois, esta estrutura anatômica é um importante sítio de infestação por A. nitens em eqüinos.

The objective of this study was to evaluate the effect of the Amblyomma cajennense strategic control program on the Anocentor nitens population. The acaricide treatments were carried out every seven days and divided in two series, the first one beginning in April 2004 (eight treatments) and the second beginning in July of the same year (five treatments), using pyrethroid chemical base - cypermethrin in the concentration of 0,015 percent. Monthly it was evaluated the infestation of A. nitens in the ear and nasal diverticulum of the equines before (October 2003 to March 2004) and after (October of 2004 to March of 2005) the strategic program of acaricide treatments. It was used score of 0 to 3 to classify the infestation levels. It did not have any significant reduction of the parasitic load of A. nitens in the ear and nasal diverticulum of the equines. Possibly, due to absence of acaricide in the nasal diverticulum. Therefore, this anatomical structure it is an important place of infestation by A. nitens in equines.

Controle estratégico de Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (acari: xodidae) em eqüinos, Minas Gerais, Brasil - Parte I / Strategic control of Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787) (acari: ixodidae) on horses, Minas Gerais, Brazil - Part I

Objetivou-se verificar a eficiência de um programa de controle estratégico de Amblyomma cajennense em eqüinos sob condições de campo. Os tratamentos carrapaticidas foram realizados a cada sete dias e divididos em dois módulos: o primeiro com início em abril e término em maio de 2004 (oito banhos) e o segundo com início e término em julho de 2004 (cinco banhos), visando atingir as larvas e ninfas do carrapato. Empregou-se a base química piretróide - cipermetrina 0,015 por cento, para banhar os eqüinos. Após o programa de controle houve uma redução de 44,85 por cento da carga parasitária de adultos do carrapato no período de outubro de 2004 a março 2005, e de 59,74 por cento, em fevereiro e março de 2005. Os resultados demonstraram a efetividade do controle estratégico. No entanto, consideram-se importantes fatores operacionais e de gerenciamento que podem interferir na aplicação prática desta tecnologia.

The aim of this study was to verify the efficiency of a strategic control program of Amblyomma cajennense in horses under field conditions. Acaricide treatments were applied at seven days intervals and divided in two series, the first one beginning in April 2004 (eight treatments), and the second one beginning in July 2004 (five treatments), aiming to control larvae and nymphs of the tick. A pyrethroid chemical base cypermethrin 0.015 percent was used for spraying the horses. There was a reduction of 44.85 percent in the adults infestetion of the tick in the period of October 2004 to March 2005, and 59.74 percent, in February and March 2005. Results showed the effectiveness of the strategic control. Important administrative and operational procedures can interfere with the practical application of this technology, and should be considered.

Eficácia do extrato aquoso de Azadiracta indica no controle de Boophilus microplus em bovino / Effectiveness of Azadiracta indica watery extract on the control of bovine ticks Boophilus microplus

This study was carried out with two groups of bovines naturally infected with Boophilus microplus. One group was treated every week during a month with Neem's watery extract and the other group was treated only once (at the test onset) with amabectin pour-on. The results of the Kruskal-Wallis test showed no significant difference (P<0.0001) between both groups (Neem and amabectin) throughout the experiment. However, time of collection [(day0 = day15) Õ day30] and age brackets (cows

Larvicidal potencial of Sapindus saponaria (Sapindaceae) against Rhipicephalus sanguineus (Latreille, 1806) (Acari: Ixodidae)

The larvicidal potential of the crude ethanolic extracts (CEE) of the stem peel of Sapindus saponaria was evaluated against Rhipicephalus sanguineus. Lethal concentrations (LC), were calculated by preparing CEE solutions at different concentrations in distilled water. Larvae fasted for 14-21 days were utilized in the bioassays, after incubation of engorged females collected from infested environments frequented by dogs in several neighborhoods of Goiânia, GO. Bioassays were performed in a specially constructed biological chamber for testing botanical acaricides, acclimatized to 27±1°C, RH>80 percent. The larvae were counted on filter paper envelopes impregnated with the solutions or distilled water and larval mortality observed after 48h. S. saponaria showed good larvicidal activity (LC50 and LC99 of 1994 and 3922ppm, respectively) and the results demonstrated its potential as a botanical acaricide and an alternative control measure for R. sanguineus.

Avaliou-se a potencialidade larvicida do extrato-bruto etanólico (EBE) da casca do caule de Sapindus saponaria sobre Rhipicephalus sanguineus. Para o cálculo das concentrações letais (CL) foram preparadas soluções com diferentes concentrações do EBE dissolvido em água destilada. Foram utilizadas larvas em jejum com 14 a 21 dias, obtidas pela incubação de teleóginas, coletadas em ambientes infestados, freqüentados por cães de vários bairros de Goiânia. Os bioensaios foram realizados em uma câmara biológica para testes com acaricidas botânicos, climatizada a 27±1°C e UR>80 por cento. As larvas foram contidas em envelopes de papel filtro impregnados com as soluções (grupo teste) ou com água destilada (grupo-controle) e a mortalidade larval foi observada após 48h. S. saponaria demonstrou atividade larvicida satisfatória (CL50 e CL99 respectivamente de 1994 e 3922ppm) e os resultados demonstraram seu potencial como acaricida botânico e medida alternativa para o controle de R. sanguineus.